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當前位置:首頁技術文章TGR Alphascreen產品

TGR Alphascreen產品

更新時間:2018-09-07點擊次數:2160

 

TGR BioSciences Pty Ltd(TGR)是一家位于澳大利亞阿德萊德的私營公司。TGR成立于2001年,致力于為基于細胞的研究應用提供創新解決方案。我們的科學家擁有細胞生物學,生物化學和免疫測定設計方面的專業知識,并開發出高質量的產品和服務,這些產品和服務已成功應用于世界各地的藥物發現計劃。

TGR在其研發方面投入了大量資金,我們通過不斷提供新的細胞檢測方法來支持客戶的研究工作,以檢測疾病所依賴的細胞過程。TGR致力于營造持續學習和改進的氛圍,以及高質量的技術支持,為我們的客戶提供性能的產品。

為此,TGR憑借其獲得專的CaptSure™技術為其核心產品奠定了基礎。這種創新的抗體固定系統提供了更快速,更簡單的免疫測定,以及顯著降低制造成本的好處。此外,我們開發了CaptSure™Multiplex,用于分析單個樣品中的多個目標。除了在自己的產品中使用CaptSure™之外,TGR還與其他公司合作,根據許可安排訪問該技術。

我們的旗艦免疫檢測系列SureFire®是一系列用于分析細胞磷蛋白的檢測試劑盒,由我們位于阿德萊德的工廠生產。SureFire和SureFire Ultra試劑盒通過PerkinElmer,Inc。(美國)分銷,PerkinElmer,Inc。是實驗室試劑的市場領者。SureFire和SureFire Ultra檢測器目前提供100多種SureFire試劑盒,可提供的工具箱,用于以均質形式測量內源性信號蛋白。

TGR的ELISAONE™是一種高靈敏度的免疫分析技術,無需標準ELISA應用所需的所有處理步驟即可提供快速結果。ELISAONE還為該平臺帶來了靈活性,允許用戶使用標準讀板器在單個96孔板上測量多個靶標。ELISAONE代表ELISA技術的下一代產品,現已通過我們的分銷合作伙伴在美國和加拿大銷售。

Alphascreen®Surefire®

用于檢測細胞信號傳導事件的簡單,無洗滌細胞試驗。

的AlphaScreen®  SureFire®  是用于蜂窩裂解物的內源性測量磷蛋白的基于抗體的測定平臺。SureFire檢測試劑盒與高度敏感的Alpha技術結合使用  ,  可以檢測各種信號通路和受體激活,采用天然和內源蛋白質細胞形式。

主要功能包括:

  • 沒有洗滌步驟
  • 非常敏感
  • 不需要轉染
  • 適用于96孔,384孔和1536孔格式

現有60多種試劑盒,  SureFire  試劑盒可用于檢測廣泛的關鍵細胞內信號傳導事件。

Surefire - Akt信號

AKT,也稱為蛋白激酶B(PKB),在細胞存活和凋亡中起關鍵作用。AKT信號傳導對于轉導生長因子介導的信號傳導和通過磷酸化和滅活幾種促凋亡蛋白(包括BAD和半胱天冬酶-9)來調節凋亡信號分子特別重要。失調的AKT信號傳導可導致細胞凋亡調節的喪失,因此該途徑是抗癌研究的主要目標。AKT的另一個重要功能是通過磷酸化對GSK-3α的負調節和β活性來調節糖原合成。

TGR已經開發了幾種用于詢問這些途徑的檢測方法:

AKT途徑目標

  • 磷酸化PDK-1phospho壞
  • 磷酸化caspase 9
  • 磷酸4EBP1
  • 磷酸GSK3α
  • 磷酸化GSK3β
  • 磷酸化AKT
  • 總AKT
  • 磷酸化mTOR
  • 磷酸化p70S6激酶

Surefire - Mapk信號

MAPK信號級聯是經典的規范信號級聯。這些途徑涉及許多不同的生物學作用,包括正常生長和發育,以及對各種細胞外刺激的應激反應。

有3種主要的MAPK信號級聯,即ERK,JNK和p38 MAPK途徑。TGR已經開發了幾種用于詢問這些途徑的檢測方法:

ERK途徑

磷酸-Mek1 
磷酸-ERK 1/2 
總ERK 1/2

JNK途徑

磷酸-MKK4 
磷酸-JNK 
總JNK

p38 MAPK途徑

磷酸-MKK3 / 6 磷酸-p38MAPK 
總p38MAPK

Surefire - TGF-B / SMAD信號

Smad蛋白家族是TGF-β受體超家族的信號傳導途徑的組分。活化的受體與特異性Smads結合并使它們在羧基末端的保守序列處磷酸化。磷酸化的Smad與Smad4形成復合物,并易位至細胞核,以調節轉錄反應。

TGR開發了3個獨立的SureFire試劑盒,用于測量Smads。磷酸化Smad 1(5/8)識別Smad 1,并且基于序列相似性,可能識別Smad 5和Smad 8.TGR還開發了SureFire檢測試劑盒,用于檢測磷酸化Smad 2和磷酸化Smad 3 。

 

Surefire - Stat信號

Janus激酶(JAK)/信號轉導和轉錄激活因子(STAT)信號通路與許多細胞反應相關,包括增殖,分化和存活,并且是控制造血和免疫發育的中心,介導細胞對細胞的反應。許多不同的細胞因子。受體激活后,STAT蛋白被JAK蛋白磷酸化,誘導磷酸-STAT同型二聚體的形成。這些活化的STAT二聚體易位至細胞核并激活特定基因的轉錄。JAK / STAT信號傳導機制的失調涉及許多疾病過程。

TGR開發了3個用于JAK / STAT信號傳導的試劑盒:

磷酸-STAT1 
磷酸-STAT3和總STAT3 
磷酸-STAT5

Surefire - NF-KB信令

非活性NF-κB位于細胞質中與抑制蛋白I-κBα的復合物中。多種細胞外應激相關信號,包括炎性細胞因子,自由基,紫外線照射和細菌或病毒抗原,可以啟動I-κB激酶(IKK)的磷酸化和活化。活化的IKK磷酸化I-κBα,其隨后與NF-κB解離。磷酸化的I-κBα被蛋白體體泛素化并降解。磷酸化的NF-κB易位到細胞核中,在那里它充當轉錄激活因子。

NF-κB途徑在調節對感染的免疫應答中起重要作用,并且NF-κB的失調與幾種疾病相關,包括癌癥和自身免疫疾病。

TGR開發了幾種  SureFire®分析方法來實現這一途徑:

  • 磷酸化IKKα
  • 磷酸化IKKβ
  • 磷酸化NF-κBp65
  • 總NF-κBp65
  • 磷酸化I-κBα
  • 總I-κBα

Surefire - mTOR信號

雷帕霉素(mTOR)的哺乳動物靶標是Ser / Thr蛋白激酶,其在細胞生長中起關鍵作用。取決于營養物的可用性,mTOR啟動控制關鍵翻譯機制的激活的信號傳導,導致特定mRNA群體的翻譯。mTOR本身通過PI3激酶/ AKT信號傳導途徑和通過自身磷酸化來調節。mTOR可在腫瘤中被去調節,并被視為癌癥的潛在靶標。

TGR已經開發了幾種用于詢問這些途徑的檢測方法:

  • 磷酸化mTOR
  • 磷酸化p70 S6激酶
  • 總p70 S6激酶
  • 磷酸化S6核糖體蛋白
  • 磷酸化AKT
  • 磷酸化4E-BP1

 

 Surefire - 受體信號

受體酪氨酸激酶(RTK)是生長因子,細胞因子和激素的細胞表面受體。與RTK細胞外結構域結合的配體在激酶催化結構域和信號蛋白募集位點誘導多個特定細胞內酪氨酸殘基的二聚化和自磷酸化。Src同源物2(SH2)和磷酸酪氨酸結合(PTB)結構域的結合位點的產生允許募集攜帶這些結合結構域的蛋白質。隨后的受體結合蛋白的磷酸化和活化導致關鍵信號轉導途徑的啟動,包括MAPK,PI-3激酶和STAT信號傳導途徑。

除了介導正常的細胞過程外,RTK還在許多類型的癌癥的發展和進展中發揮關鍵作用。

TGR已經開發了幾種用于詢問這些受體的檢測方法:

  • 磷酸化EGF受體
  • 磷酸化的ErbB2
  • 磷酸胰島素受體
  • 磷酸-c-MET
  • 磷酸化VEGF受體2
  • 磷酸-ALK(p-Tyr1586和p-Tyr1604)
  • 磷酸-IGF-1受體

Surefire - ATM / ATR信令

共濟失調毛細血管擴張癥突變激酶(ATM)和共濟失調性毛細血管擴張癥和Rad3相關激酶(ATR)是調節G1,S和G2細胞周期檢查點的絲氨酸/蘇氨酸激酶,并參與DNA修復。

ATM和ATR磷酸化幾種常見底物以及特定底物,以調節檢查點信號傳導。它們的底物包括p53,Chk1和Chk2。

TGR開發了幾種SureFire®檢測試劑盒來詢問ATM / ATR信號:

  • 磷酸化的Chk1
  • 磷酸Chk2的
  • 磷酸-4E-BP1(p-Thr37 / 46和p-Thr70)
  • 磷酸化p53(p-Ser15和Ser392)
  • 總p53

TGR開發了幾種可用作蛋白質標準化工具(例如GAPDH)的試驗,或受幾種途徑影響的試驗。這些分析包括:

  • 磷酸-eIF-4E磷酸組蛋白H3
  • GAPDH
  • 磷酸化CREB
  • 磷酸ATF-1

Alphascreen®SureFireHV

AlphaScreen®SureFireHV™分析專門針對需要與96孔板兼容的體積的應用。AlphaScreen®SureFireHV™特別適用于低通量應用,以及小體積移液要求的情況。每個試劑盒基于50μL/孔的終反應體積提供100個測定點。

AlphaScreen®SureFireHV™提供標準AlphaScreen®SureFire®的所有優點,但采用方便的96孔分析方式。 

 

 

產品清單:

 

4E BP1 phospho-Thr37/46
4E BP1 phospho-Thr70
AKT 1 (Total)
AKT 1 phospho-Ser473
AKT 1 phospho-Thr308
AKT 1/2 phospho-Ser473
AKT 1/2/3 (Total)
AKT 1/2/3 phospho-Ser473
AKT 1/2/3 phospho-Thr308
ALK (Total)
ALK phospho-Tyr1586
ALK phospho-Tyr1604
ATF1 phospho-Ser63
ATF2 phospho-Thr71
BAD phospho-Ser112
BAD phospho-Ser136
Caspase 9 phospho-Ser196
b-Catenin phospho-Ser45
CHK1 phospho-Ser345
CHK2 phospho-Ser68
c-JUN phospho-Ser63
c-JUN phospho-Ser73
c-MET phospho-Tyr1234/1235
Cofilin phospho-Ser3
CREB phospho-Ser133
EGF receptor phospho-Tyr1068
eIF2alpha phospho-Ser51
eIF4E phospho-Ser209
ELK1 phospho-Ser383
ErbB2 phospho-Tyr1221/1222
ERK 1/2 (Total)
ERK 1/2 phospho-Thr202/Tyr204
GAPDH
GSK3alpha phospho-Ser21
GSK3beta phospho-Ser9
Histone H3 phospho-Ser10
HSP27 phospho-Ser82
IGF-1 receptor phospho-Tyr1135/1136
I-kBalpha (Total)
I-kBalpha phospho-Ser32/36
IKKalpha phospho-Ser176/180
IKKbeta phospho-Ser177/181
Insulin receptor phospho-Tyr1150/1151
JNK 1/2/3 (Total)
JNK 1/2/3 phospho-Thr183/Tyr185
JNK 1/3 phospho-Thr183/Tyr185
MEK 1 phospho-Ser217/221
MKK 3/6 phospho-Ser189/207
MKK 4 phospho-Ser257/261
mTOR phospho-Ser2448
NF-kB p65  (Total)
NF-kB p65 phospho-Ser536
p38 MAPK (Total)
p38 MAPKalpha phospho-Thr180/Tyr182
p53 (total)
p53 phospho-Ser15
p53 phospho-Ser392
p70 S6 kinase (total)
p70 S6 kinase phospho-Thr229
p70 S6 kinase phospho-Thr389
p70 S6 kinase phospho-Thr421/Ser424
PDK-1 phospho-Ser241
S6 ribosomal protein phospho-Ser235/236
S6 ribosomal protein phospho-Ser240/244
SMAD 1 phospho-Ser463/465
SMAD 2 phospho-Ser465/467
SMAD 3 phospho-Ser423/425
STAT1 phospho-Tyr701
STAT3 (total)
STAT3 phospho-Tyr705
STAT5 A/B phospho-Tyr694/699
Topoisomerase II alpha (total)
Topoisomerase II alpha phospho-Tyr1106
Topoisomerase II alpha phospho-Tyr1343
VEGF receptor 2 phospho-Tyr1175

 

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