mitegen M-WS180320-1說明書 

品牌:mitegen

貨號：M-WS180320-1

品名：WatershedTM System Kit

Watershed TM

在收獲期間防止水滴變干。

Watershed™：用于蛋白質晶體學的濕度控制工作站

一種功能強大的新型臺式工具，用于優化您的晶體收獲和后期生長治療方案。

• 將下降工作時間增加10倍或更多
• 減少蛋白質沉淀和降解
• 從每滴收獲更多的晶體
• 減少脫水和晶體非同構
• 可控制地使晶體脫水以改善衍射
• 使用蓋玻片，載玻片，結晶板或家用X射線源

Watershed系統是與Douglas Juers教授（惠特曼學院）合作開發的。

Watershed為各種常見的樣品制備任務提供受控濕度環境，包括

• 將晶體彼此分離，沉淀物和蛋白質皮膚之間可能形成結晶滴;
• 將晶體浸泡在含有冷凍保護劑，重原子或配體的溶液中;
• 將水晶從水滴上收集到X射線樣品支架上;
• 從晶體中吸去或吸走多余的液體，以減少背景X射線散射，并在切入冷卻過程中提高樣品冷卻速率;
• 將晶體放入MiTeGen的MicroRT毛細管或玻璃毛細管中進行室溫數據采集; 和
• 將晶體的水合作用調節到所需的相對濕度，這可能與它們生長的相對濕度不同，以改變蛋白質結構或優化衍射性質。

分水嶺包括一個水箱，一個控制單元和兩個工作站，提供50％和> 90％RH之間可控的相對濕度。

加濕室工作站接受18或22毫米蓋玻片或標準顯微鏡載玻片上的液滴。可以使用標準晶體環，測角儀基座和磁棒在工作站內收獲和操作晶體，同時使用長工作距離立體顯微鏡從上方觀察晶體。一旦安裝，樣品可以轉移到含有潮濕空氣的冷凍管中，然后可以取出樣品+冷凍管并將其運輸到例如低溫冷卻裝置。

定向噴嘴工作站可與多孔結晶板中的晶體一起使用，以提供指向被檢井的加濕氣流。該工作站還可以與實驗室X射線源一起使用，以在衍射數據收集期間可控地改變晶體的水合作用。

維持和控制樣品水合是生物分子結晶學以及細胞生物學，輔助生殖和相關領域中的關鍵問題。Watershed為此問題提供了方便，強大，低成本的解決方案。

當操作蓋玻片，載玻片或多孔微孔板中液滴中所含的晶體時，蒸發和蛋白質降解會導致沉淀物和蛋白質皮膚的形成，晶體聚集和粘附，以及晶體開裂和其他損壞。

蒸發限制了在晶體操作和收獲期間給定的液滴暴露于空氣的時間，之后液滴和其中的剩余晶體變得不可用。

在含有冷凍保護劑，重原子化合物或配體的溶液中晶體浸泡期間的蒸發可導致晶體內這些溶質濃度的不確定性和晶體與晶體的變化。

在這些步驟期間以及在晶體收集到結晶學環路或安裝期間的蒸發可導致晶體衍射性質的降低和晶胞尺寸和蛋白質結構中晶體與晶體的變化。

后生長處理過程中的晶體脫水是室溫X射線數據采集中晶體非同構性的主要原因，也是低溫非同構的重要原因。當仔細控制晶體水合時，典型的室溫單位晶胞體積變化為1％或更多，降低至小于0.2％。

另一方面，對于大約5-10％的蛋白質晶體，適度控制的脫水可以改善整體晶體順序和衍射性質，并且當晶體衍射不充分時提供有用的補救方法。

Watershed提供了一種方便，低成本的解決方案，用于在晶體收集，操作，安裝和X射線數據收集期間控制水合環境。

通過使用Watershed，

• 相對于相對濕度低于50％的典型實驗室環境，液滴和樣品的工作時間可以增加10倍或更多。
• 每種液滴在變得無法使用之前可以收獲更多的晶體。
• 晶體同構得到改善，提高了數據質量，有時還減少了結構測定所需的晶體數量。
• 蛋白質結構遠離其生物學相關形式的擾動減少。
• 數據的質量和可重復性得到改善。

流域將高濕度，室溫空氣（通過室溫水鼓泡干燥空氣產生）與干燥空氣混合，以獲得具有所需相對濕度的空氣流。

相對濕度范圍：50％至> 90％RH

水箱容量：2.5加侖/ 10升

要求：

電源：110-125 VAC，50-60 Hz，具有GFCI保護

在25psi的壓力下干燥空氣或氮氣的來源

蒸餾水或去離子水

控制單元：

尺寸：5.3（高）x 14.0（寬）×10.0（深）英寸/ 135×357×255毫米

重量：11.5磅/5.2千克

水缸：

尺寸：10.2（高）x 14.0（寬）×9.3（深）英寸/ 260×357×235毫米

重量：5.0磅/ 2.3公斤空; 26磅/11.8公斤滿

加濕外殼工作站：

尺寸：2.6（高）×4.5（寬）×2.2（深）英寸/ 66×115×55毫米

接受兩個18毫米或22毫米圓形蓋玻片或一個25 x 75毫米顯微鏡載玻片

所需的顯微鏡工作距離：小1.8英寸/ 45毫米

可定位噴嘴工作站：

磁性底座直徑：2英寸/ 54毫米

可定位的管道長度：19英寸/ 500毫米

通過限制晶體安裝過程中的脫水，提高了大分子低溫晶體中單位晶胞參數的重現性， ”Christopher Farley，Geoffry Burks，Thomas Siegert和Douglas H. Juers，Acta Cryst。D70,2111-2124（2014）。

“ 使用HC1b濕度控制器進行蛋白質晶體脫水的通用方案 ”，Carina MC Lobley，James Sandy，Juan Sanchez-Weatherby，Marco Mazzorana，Tobias Krojer，Rados?awP。Nowak和Thomas L. Sorensen，Acta Cryst。D72,629-640（2016）。

“ 受控晶體脫水的自動化和經驗：來自歐洲同步加速器HC1協作的結果，”Matthew W. Bowler，Uwe Mueller，Manfred S. Weiss，Juan Sanchez-Weatherby，Thomas LM。Sorensen，Marjolein MGM Thunnissen，Thomas Ursby，Alexandre Gobbo，Silvia Russi，Michael G. Bowler，Sandor Brockhauser，Olof Svensson和Florent Cipriani，Crystal Growth and Design 15,1043-1054（2015）。

“ 應用于安裝的蛋白質晶體的濕度控制和親水膠涂層改善了X射線衍射實驗，”Seiki Baba，Takeshi Hoshino，Len Ito和Takashi Kumasaka，Acta Cryst。D69,1839-1849（2013）。

“ 測量普通沉淀劑濃度的平衡相對濕度：促進受控脫水實驗 ”，作者：MJ Wheeler，S。Russi，MG Bowler和MW Bowler，Acta Cryst。F 68,111-114，（2011）。

“ 通過濕度控制改善衍射：與X射線光束兼容的新型設備。”Juan Sanchez-Weatherby，Matthew W. Bowler，Julien Huet，Alexandre Gobbo，Franck Felisaz，Bernard Lavault，Raphael Moya，Jan Kadlec，Raimond BG Ravelli，和Florent Cipriani，Acta Cryst。D65,1237-1246（2009）。

“ 用于蛋白質晶體的新型自由安裝系統：通過控制的濕度變化轉換和改善衍射功率 ”，Reiner Kiefersauer，Manuel E. Than，Holger Dobbek，Lothar Gremer，Marcos Melero，Stefan Strobl，Joao M. Dieas，Twefik Soulimane和Robert Huber，J。Appl。CRYST。33,1223-1230（2000）。

“ 晶體安裝單元的設計，允許在X射線衍射期間控制蛋白質晶體的濕度變化，”MG Pickford，EF Garman，EY Jones和DI Stuart，J.Appl。CRYST。26,465-466（1993）。

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