ajinomoto AK03N說明書

IPS / ES細胞用于臨床研究的無飼養層培養基
StemFit _® AK03N

它是
臨床研究的媒介，不含動物或人源成分，可以大量增加未分化的iPS / ES細胞。

該產品由3種溶液組成，并在使用時混合制備。
在一組中，可以制備約500mL當量的培養基。

*已經證實，應用了“源自生物來源的原料標準”的原材料不包括在厚生勞動省藥品評價機構PMDA的藥事處。

細胞生長曲線

StemFit _®人iPS細胞在AK03N（201B7股）培養的，相當長的時間周期顯示出穩定的高生長速率。

用各種支架進行培養評估

-511 IMatrix，玻連蛋白-N，基質膠_® 6孔板涂覆的人iPS細胞（201B7株）StemFit _®它被證實是可能的培養與AK03N。此外，證實未分化的標志物OCT 3/4（紅色）和TRA-1 - 60（綠色）在每個支架中是陽性的。

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克隆iPS細胞

StemFit _®中通過使用的培養基中培養的iPS細胞，可以是基因組編輯，以及克隆。

參考書目

1）Shin-Il Kim等人Methods Mol Biol.2016 1357：111-31。

2）Naoki Ichiyanagi等人，Stem Cell Reports。2016年4月12日; 6（4）：496-510。

確認分化能力為三個胚層

StemFit _® IPS細胞培養使用的培養基外胚層，中胚層分化成內胚層已被證實。

分化為胰腺內分泌細胞

StemFit _®使用AK03N介質和iMatrix-511，使用上述方案在75000細胞/ cm 2，在培養23天接種后保持1231A3應變iPS細胞。

• 到A）胰祖細胞培養13天后（PP）和23個的胰腺內分泌細胞（EC），評估OCT-4，PDX-1，INS在qPCR中表達（N = 3）。基因表達是相對值，人胰島中的表達水平為1。
• B）使用免疫染色評估胰島素表達。

參考文獻：Shahjalal HM等，Al J Mol Cell Biol。2014年10月; 6（5）：394-408

分化為心肌細胞

StemFit _®使用AK03N介質和iMatrix-511，保持201B7應變iPS細胞播種后板，使用上述方案制備的心肌細胞。21天后進行各種評價。

• A）使用FACS的cTNT陽性細胞比率測量結果。
• B）使用免疫染色的α-輔肌動蛋白表達的圖像。比例尺：100μm。
• C）使用MED-64測量細胞外電位的結果。在第21天將細胞粘附到涂有纖連蛋白的電極上并測量細胞外電位信號，Interspike間隔，場電位持續時間（FPD）。

*此數據由iPS Portal Co.，Ltd。收購和分析。
參考文獻：Miki等，Cell Stem Cell，16,699,2015

分化為神經細胞

StemFit _®使用AK03N介質和iMatrix-511，以5,000個細胞/厘米2，誘導分化成使用癥狀的方法的雙重抑制SMAD神經干細胞接種后保持201B7應變iPS細胞。神經干細胞在不包括bFGF的條件下培養17天，并誘導至神經元。

• A）通過qPCR評估SYNAPSIN，NEUROD1表達。
• B）通過免疫染色證實MAP2的表達。比例尺= 
  200μmPO：聚鳥氨酸，P：通過。n = 3

與其他公司進行細胞和基因治療進行彈射器培養試驗

細胞與基因治療彈射器是促進英國細胞治療和基因治療領域的商業化的研究，建立了以推進企業在同一領域，它是獨立的的研究機構。為了實現使用iPS細胞的再生醫學，我們正致力于開發具有成本效益的細胞培養系統。在該研究中，通過將iPS細胞與其他公司的不同組成的培養基進行比較來進行宜培養基的選擇。其結果是，“StemFit _®iPS細胞培養” AK03N，除了高細胞生長性能，基因表達的均勻性，使得不存在染色體異常，并且通過使用第三-4產物培養iPS細胞比較顯示出優異的特性