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當前位置:首頁技術文章ScienTech KTS-01說明書

ScienTech KTS-01說明書

更新時間:2019-07-29點擊次數:2207

ScienTech Corp.是一個綜合性學科,提供生物技術和化學領域的廣泛服務。我們的主要目標是成為您的研究合作伙伴。

除了我們自己的實力,包括經驗豐富的專業科學家,技術人員和先進的基礎設施,我們與其他三個研究小組合作,我們是印度班加羅爾的Microtest Innovations的主要合作伙伴之一。我們在生物技術和化學領域已有12年的歷史,我們的一些科學家擁有超過30年的經驗。

 

ScienTech KTS-01說明書

PAP (Pyrophosphorolysis-activated polymerization)/ KlenTaq-S

 

PAP(焦磷酸解 -活化聚合)/ KlenTaq -S

 

PAP是一種*的DNA擴增方法(Liu和Sommer:BioTechniques,29 [2000],1072-1080; Nucleic Acids Res,30 [2002],598-604),其中焦磷酸解 和聚合通過DNA聚合酶使用3連續偶聯。 '封閉的底漆。  焦磷酸解是DNA聚合的逆反應,其中在無機焦磷酸鹽存在下酶除去引物模板雙鏈體3'末端的封閉核苷酸(通常是雙脫氧)。在通過焦磷酸解作用除去封閉的核苷酸后,然后可以通過DNA聚合延長活化的引物。

由于PAP 的高特異性(1 / 3x10 11) ,該過程正成為 在大量過量野生型等位基因存在下檢測稀有突變,大雜合缺失,基因重復等的有力工具(Liu et al:Biotechniques),40 [2006],661-668)。理論上,PAP可以檢測3× 10 11個野生型等位基因中的單個堿基突變。

PAP可以被用來作為一種替代或證實的實時PCR (Boon等人: Prenat   DIAGN 27 [2007],932-937)

 

KlenTaq -S和PAP反應。

已經發現KlenTaq -S是 PAP反應中許多研究小組的合適的熱穩定 Taq DNA聚合酶。

 

KlenTaq -S由該基因的5'缺失和F667Y(Tabor和Richardson)突變表達,編碼Thermus aquaticus DNA聚合酶。反復暴露于98 0在PR1反應C緩沖區的酶不顯示活性的任何顯著損失。

KlenTaq - S的濃度:       10U /μl

 

建議的PAP反應條件(25μl ):

50 mM Tris-HCl,7.8,16 mM硫酸銨,3.5 mM 氯化鎂,  25μM,每種四種dNTP,每種引物0.1μM,5-200 ng 模板,90μM無機焦磷酸鹽(Na 4 PPi),2%二甲基亞砜(DMSO) ),2.5 U KlenTaq -S。

騎行條件:

95 0 Ç   為 1分鐘(變性),然后

 

94 0 C持續15秒

60 0 C持續30秒

64 0 C持續30秒

68 0 C 1分鐘

72 0 C持續1-2分鐘,共25-45個循環

 

提供緩沖液  ( 10X PR1):

500 毫米 的Tris-HCl,pH值7.8,160 mM的  ( NH 42 SO 4,35 毫的MgCl 2,1.5毫克/毫升BSA

 

訂購信息:

訂貨號 :KTS-01

數量:                            100μl或1000 U /小瓶

價格:                                     $ 200 /小瓶(1000 U)

運費:              美國35美元(FedEx隔夜)

 

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