ubiquigent 63-1004-025說明書

• Name
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• Cul2/Rbx1 [untagged]
  63-1004-025
  25 µg
  £250
•  
• 物種
  人類
• 來源
  昆蟲（Sf21）
• 數(shù)量
  25微克
• 貯存
  -70°攝氏度
• 專注
  0.5毫克/毫升
• 公式
  50 mM HEPES pH 7.5、150 mM氯化鈉，2 mM二硫蘇糖醇，10％甘油
• 分子量
  Cul2 =?87.1kDa；Rbx1 =?12.3kDa
• 穩(wěn)定
  在-70°C下存放12個(gè)月；根據(jù)需要等分
• 蛋白質(zhì)序列
  登記號(hào)：Cul2 = AAH09591.1 Rbx1 = NP_055063.1。有關(guān)完整蛋白質(zhì)序列的信息，請(qǐng)下載分析證書pdf。
• 質(zhì)量檢查；蛋白質(zhì)鑒定
  通過質(zhì)譜確認(rèn)。
• 質(zhì)量檢查；活動(dòng)
  E3連接酶測(cè)定：通過在NEDD8 E3連接酶His-DCNL2和裝載了硫酯的His-UBE2M-NEDD8存在下作為Neddylation底物的能力間接驗(yàn)證了Cul2 / Rbx1的活性。在存在和不存在His-DCNL2的情況下，在兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)T0和T2分鐘，比較了Cul2 / Rbx1和負(fù)載有硫酯的His-UBE2M-NEDD8的孵育。證明了在His-DCNL2存在下Cul2亞基的Neddylation。

泛素化途徑的酶在許多細(xì)胞過程中起著關(guān)鍵作用，包括調(diào)節(jié)和靶向的蛋白酶體依賴性底物蛋白降解。泛素化過程涉及三類酶。活化酶（E1s），偶聯(lián)酶（E2s）和蛋白質(zhì)連接酶（E3s）。Cullin-ring-Ligases（CRL）是泛素E3連接酶的大類別之一，NEDDylation途徑的酶在這些CRL的激活中起關(guān)鍵作用。類似于泛素化，E1活化酶（APP-BP1 / UBA3異二聚體）和E2綴合酶（UBE2M或UBE2F）參與了哺乳動(dòng)物Cullin Ring Ligases（CRLs）的NEDDylation（Meyer-Schaller等人，2009； Huang）等人，2011； Morimoto等人，2003）。Kipreos等人首先描述了人Cullin1-5基因。（1996）。Cullin RING連接酶（CRL）構(gòu)成了大的泛素連接酶亞家族，這些泛素連接酶被Neddylation激活。CRL參與細(xì)胞周期調(diào)節(jié)，DNA復(fù)制和DNA損傷反應(yīng)（DDR）。CRL由幾個(gè)亞基組成，包括支架蛋白（cullin）和無名指蛋白；分別結(jié)合泛素E2 Ube2M或Ube2F的Rbx1（Cul1-4）或Rbx2（Cul5）（Sarikas等，2011; Skowyra等，1997）。來自啤酒酵母的一個(gè)要鑒定的CRL被命名為Skp1 / Cullin或Cdc53 / F-box（SCF）。許多CRL E3連接酶具有其他接頭蛋白，例如與Cul2相關(guān)的Elongin B / C和與Cul4相關(guān)的DDB1。Elongin B / C-Cul2或Cul5-SOCS盒（ECS）家族也屬于CRL超家族（Kile等，2002）。SCF和ECS泛素連接酶具有結(jié)構(gòu)相似性，因?yàn)閮烧叨及琑bx1或Rbx2作為RING指蛋白，而Cul1，Cul2或Cul5作為支架蛋白（Kile等，2002； Kamura等，2004）。von Hippel-Lindau（VHL）復(fù)合物是一種泛素連接酶，靶向蛋白酶體降解的低氧誘導(dǎo)因子α（HIF）轉(zhuǎn)錄因子家族。該復(fù)合物包含pVHL，Cul2 / Rbx1亞基和BC盒蛋白Elongin B / C。功能性pVHL蛋白的丟失會(huì)阻止HIF1的氧依賴性降解，從而導(dǎo)致HIF1依賴性基因的組成型表達(dá)，進(jìn)而導(dǎo)致VHL疾病（Okumura等人，2012）。Huang G，Kaufman AJ，Ramanathan Y，Singh B.（2011）SCCRO（DCUN1D1）促進(jìn)核苷轉(zhuǎn)移E3復(fù)合物的核轉(zhuǎn)運(yùn)和組裝，J Biol Chem 286，10297-10304。

參考：
Kamura T，Maenaka K，Kotoshiba S，Matsumoto M，Kohda D，Conaway RC，Conaway JW，Nakayama KI。（2004）VHL框和SOCS框域確定泛素連接酶的Cul2-Rbx1和Cul5-Rbx2模塊的結(jié)合特異性。基因開發(fā)18，3055-65。

Kile BT，Schulman BA，Alexander WS，Nicola NA，Martin HM，Hilton DJ。（2002）SOCS框：關(guān)于破壞和退化的故事。Trends Biochem Sci 27，235-41。

Kipreos ET，Lander Land，Wing JP，He WW，Hedgecock EM。（1996）cul-1是秀麗隱桿線蟲細(xì)胞周期退出所必需的，它鑒定了一個(gè)新的基因家族，Cell 85，829-839。

Meyer-Schaller N，Chou YC，Sumara I，Martin DD，Kurz T，Katheder N，Hofmann K，Berthiaume LG，Sicheri F，Peter M.（2009）人Dcn1類蛋白DCNL3促進(jìn)膜上Cul3的腺苷化，Proc Natl美國科學(xué)院院刊106，12365-12370。
Morimoto M，Nishida T，Nagayama Y，Yasuda H.（2003）Roc1作為Nedd8-E3連接酶促進(jìn)Cul1的Nedd8修飾，并調(diào)節(jié)其穩(wěn)定性，Biochem Biophys Res Commun 301，392-398。

Okumura F，Matsuzaki M，NakatsukasaK，Kamura T.（2012年）。前Oncol 2，1-13。

Skowyra D，Craig KL，Tyers M，Elledge SJ，Harper JW。（1997）F-box蛋白是將磷酸化底物募集到SCF泛素-連接酶復(fù)合物的受體，細(xì)胞91，209-219。