?biosb BSB-3771-3說(shuō)明書(shū)

更新時(shí)間：2022-04-06

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biosb BSB-3771-3說(shuō)明書(shū)

TintoFast Ki-67 (RM360), RMab

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TintoFast Ki-67 Antibody Immunohistochemistry on a Frozen Acetone-fixed Squamous Cell Carcinoma Tissue

可能的使用

用于莫氏體外診斷

總結(jié)與說(shuō)明

Ki-67 蛋白是增殖的細(xì)胞標(biāo)志物。它與細(xì)胞增殖密切相關(guān)。在間期，Ki-67 抗原只能在細(xì)胞核內(nèi)檢測(cè)到，而在有絲分裂中，大部分蛋白質(zhì)被重新定位到染色體表面。Ki-67 蛋白存在于細(xì)胞周期的所有活動(dòng)階段（G1、S、G2 和有絲分裂），但在靜息細(xì)胞 (G0) 中不存在。

TintoFast Ki-67 抗體是確定給定細(xì)胞群生長(zhǎng)分?jǐn)?shù)的標(biāo)記。Ki-67 陽(yáng)性腫瘤細(xì)胞的比例（Ki-67 標(biāo)記指數(shù)）通常與癌癥的臨床病程相關(guān)。在這方面研究得好的例子是前列腺癌和乳腺癌。

抗體類(lèi)型

兔單克隆

克隆

RM360

同型

IgG

反應(yīng)性

石蠟，冷凍

本土化

核

控制

睪丸，扁桃體，骨髓，胎盤(pán)，結(jié)腸，。扁桃體、輸卵管、星形細(xì)胞瘤、乳腺癌、結(jié)腸癌

介紹

TintoFast Ki-67 是一種兔單克隆抗體，來(lái)源于細(xì)胞培養(yǎng)上清液，經(jīng)過(guò)濃縮、透析、過(guò)濾滅菌和稀釋在 pH 7.5 的緩沖液中，含有 BSA 和疊氮化納作為防腐劑。

可用性

目錄號(hào)	抗體類(lèi)型	稀釋	數(shù)量/數(shù)量
BSB-3771-3	TintoFast 預(yù)稀釋	可以使用	3.0 毫升
BSB-3771-7	TintoFast 預(yù)稀釋	可以使用	7.0 毫升
BSB-3771-15	TintoFast 預(yù)稀釋	可以使用	15.0 毫升

Mohs IHC 程序

莫氏冷凍組織的標(biāo)本制備

將標(biāo)本嵌入 OCT 中的低溫恒溫器內(nèi)。
在 4-5 µm 處切割切片并安裝在帶正電的載玻片上，例如 Bio SB Hydrophilic Plus 載玻片 (BSB 7028) 或 TintoDetector 蓋間隙載玻片 (BSB 7006) 的下三分之一處。
在室溫下風(fēng)干載玻片 2 分鐘，然后在培養(yǎng)箱或干浴中在 60°C 下孵育載玻片 3 分鐘。
在室溫下用丙酮固定 2 分鐘，然后讓載玻片風(fēng)干。

莫氏冷凍組織的預(yù)處理

將 TintoDetector 培養(yǎng)箱預(yù)熱至 110 °C。
將 TintoDetector Cap Gap 載玻片 (BSB 7006) 面對(duì)面放置，然后將它們插入 TintoDetector 載玻片支架 (BSB 7003)。
將載玻片浸入含 EDTA 的 ImmunoDNA Retriever 中，通過(guò)毛細(xì)作用提取足夠的溶液以覆蓋組織。
在預(yù)熱的 TintoDetector 培養(yǎng)箱中加熱載玻片 3 分鐘。
將載玻片轉(zhuǎn)移至室溫并冷卻 1 分鐘。

莫氏 IHC 檢測(cè)

HIER 后，將載玻片轉(zhuǎn)移到 ImmunoDNA 清洗機(jī)，靜置 1-2 分鐘。
對(duì)于手動(dòng)染色，在環(huán)境溫度下進(jìn)行抗體孵育。對(duì)于自動(dòng)染色方法，請(qǐng)根據(jù)儀器制造商的說(shuō)明進(jìn)行抗體孵育。
用 ImmunoDNA 洗滌器或去離子水清洗載玻片。
繼續(xù) IHC 檢測(cè)協(xié)議。用 ImmunoDNA 洗滌液在每個(gè)步驟之間清洗載玻片。

HRP Green 免疫組化方案的縮寫(xiě) Mohs PolyDetector Plus DAB HRP Brown

與一抗孵育 5 分鐘
用緩沖液（TBST 或 PBST）清洗
用 M/R 鏈接孵育 4 分鐘
用緩沖液（TBST 或 PBST）清洗
HRP 標(biāo)簽 4 分鐘。
用緩沖液（TBST 或 PBST）清洗
準(zhǔn)備
- DAB Brown（在 1ml DAB 緩沖液中加入 1 滴 DAB Chromogen；充分混合）
- 或 HRP Green（在 1 ml HRP Green Buffer 中加入 1 滴 HRP Green Chromogen；充分混合）
用 DAB 或 HRP Green 孵育 1-2 分鐘
用緩沖液（TBST 或 PBST）清洗
用蘇木精或核固紅復(fù)染 30 秒
用緩沖液（TBST 或 PBST）清洗
使用 AquaMounter 安裝或使用 Fast ChromoProtector 使組織脫水，然后使用 PermaMounter 安裝

步	Mohs PolyDetector HRP Green 或 DAB 20 分鐘協(xié)議
希爾	3 分鐘。
一抗	5分鐘。
第一步檢測(cè)	4分鐘。
第二步檢測(cè)	4分鐘。
底物色原	1-2 分鐘。
復(fù)染/蓋玻片	變化

此協(xié)議也可用于使用檸檬酸鹽或 EDTA 檢索的 FFPE 組織。

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