clemente-associates摘要

背景：全球約40%的不孕癥臨床情況是由男性因素導(dǎo)致的（Kumar N.和Singh A.K.2015）。男性不育通常反映在精液分析參數(shù)上。然而，精子本身的一些核心問題并不能通過簡單的精液分析反映出來。導(dǎo)致這種不育的主要核心因素之一是DNA斷裂，這種斷裂可以被描述為DNA斷裂，反映了影響胚胎分子和細(xì)胞的核損傷

發(fā)展課程（Seli，E.，Gardner，D.K.，Schoolcraft，W.B.，Moffatt，O.，&Sakkas，D.2004。密度梯度離心（DGC）作為常規(guī)精子制備技術(shù)，作為全面減少劣質(zhì)精子的診斷工具，但在ART之前沒有對(duì)每個(gè)精子進(jìn)行單一選擇（Sakkas，D.、Manikardi，G.C.、Tomlinson，M.、Mandrioli，M.、Bizzaro，D.、Bianchi，P.G.、Bianchi，U.2000）。磁激活精子富集（MASE）是一種用于ART技術(shù)的新精子制劑，它使用膜聯(lián)蛋白V和凝集素，即LCA和PNA，與凋亡、壞死、畸形或受損的精子頂體和糖萼區(qū)域結(jié)合（Sutovsky和Kennedy，2013）。這為精子受精提供了一個(gè)單一的選擇。研究目的是比較ICSI管理周期（MASE）和（DGC）中精子的兩種處理技術(shù)。比較因素包括受精、卵裂率、囊胚形成和確認(rèn)妊娠。使用SPSS進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。

方法：2019年2月至2019年9月在el nada IVF中心進(jìn)行的一項(xiàng)前瞻性研究包括132對(duì)接受生育治療的夫婦。所有的病例均為男性因素不育，因?yàn)樗信缘哪挲g均正常≤ 36歲，正常基礎(chǔ)FSH水平，BMI≤ 30，無子宮異常，無PCO綜合征，子宮內(nèi)膜厚度≥ 9毫米。在ICSI之前，將每個(gè)病例提供的精子樣本分為兩組（第一組用MASE處理，第二組用DGC處理），用于精子選擇。每組胚胎在相同條件下培養(yǎng)。ET隨機(jī)分為2組（每種技術(shù)66例）。

結(jié)果：磁激活精子富集（MASE）和密度梯度離心（DGC）兩組共注入3066個(gè)卵母細(xì)胞（平均+/-SD=11.88±0.3 MASE組vs 11.05±0.29 DGC組），在受精率（平均+/-SD=10.02±0.24 MASE vs 9.08±0.25 DGC）（p值=0.008）、卵裂率（平均+/-SD=8.08±0.2 MASE vs 6.9±0.24 DGC）（p值=0.0001）方面，與普通密度梯度柱離心（DGC）相比，通過磁激活精子富集（MASE）分選的精子形成的胚胎質(zhì)量總體提高，形成的囊胚（6.13±0.19 MASE vs 4.86±0.2 DGC）（p=0.00001），（4.07±0.15 MASE vs 3.74±0.15）顯著（p=0.0001），有利于MASE，而對(duì)于MASE組（2.75±0.24）vs DGC（2.81±0.20）（p=0.0008），中等等級(jí)胚胎（5BA）。66例中有53例確診妊娠（MASE），而66例中有35例確診妊娠（DGC）。進(jìn)行卡方檢驗(yàn)（0.05顯著性），fisher精確顯著性（0.002）。

結(jié)論：與DGC相比，MASE作為一種實(shí)驗(yàn)室工具，在ICSI程序中是一種非常有效的精子選擇方案，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但建議未來的研究工作以多中心的方式進(jìn)行，并考慮到患者的種族和種族差異，以更大的樣本量作為對(duì)結(jié)果的反應(yīng)

討論

精子DNA斷裂在不孕癥診所的日常實(shí)踐中是一個(gè)日益突出的問題。在體外受精實(shí)驗(yàn)室實(shí)踐中，在DNA高度斷裂的情況下選擇精子被認(rèn)為是先進(jìn)的。正常精子的精子選擇性將在活產(chǎn)率和妊娠率方面加強(qiáng)ICSI管理周期。

就人類精液處理而言，DGC被認(rèn)為是IVF實(shí)驗(yàn)室非常有用的方案，用于從射精中選擇形態(tài)良好的活動(dòng)部分。盡管經(jīng)常使用，但它缺乏選擇精子的能力，因?yàn)榫泳哂凶罴训腄NA結(jié)構(gòu)完整性，而DNA結(jié)構(gòu)完整性是ART周期成功的基石

（Avenda~no等人，2009年）[2]。許多生殖研究表明，并顯示出統(tǒng)計(jì)上顯著的受精失敗率，ART治療后胚胎發(fā)育受損和妊娠丟失，與低DNA斷裂病例相比，男性精子DNA斷裂率較高（Seli、Gardner、Schoolcraft、Moffatt和Sakkas，2004；Velez de la Calle等人，2008；Zini、Boman、Belzile和Ciampi，2008）[14]

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之前的一個(gè)研究小組已經(jīng)開展了與當(dāng)前研究類似的研究工作，他們使用納米技術(shù)分子靶向細(xì)胞，使用生物相容性磁性納米顆粒（MNP）在磁場中檢測和去除受損精子。新鮮精液國際婦產(chǎn)科研究雜志

將14與不同量（0、87.5和175.g）的MNP結(jié)合物（膜聯(lián)蛋白V-MNP和凝集素MNP）混合，并在實(shí)驗(yàn)1中培養(yǎng)（10至15分鐘）37℃。在實(shí)驗(yàn)2中，將延長的精液與最佳濃度的MNP結(jié)合物混合并孵育（0、30、90或120分鐘）。在實(shí)驗(yàn)3中，兩種MNP綴合物（87.5 g–30 min）對(duì)

評(píng)估精子，然后評(píng)估精子生育力。對(duì)招募的所有研究對(duì)象的精子運(yùn)動(dòng)、活力和形態(tài)特征進(jìn)行評(píng)估。

研究人員在其研究結(jié)果中發(fā)現(xiàn)，納米級(jí)精子的運(yùn)動(dòng)能力以靜態(tài)顯著方式得到改善（P值<0.05）。通過測定活性氧物種和頂體完整性、質(zhì)膜和線粒體膜，對(duì)精子活力進(jìn)行了評(píng)估，納米選擇組和對(duì)照組之間沒有差異

精子。

總之，與當(dāng)前的研究結(jié)果類似，磁納米選擇的好處在于高通量靶向受損精子，去除并快速、輕松地富集精子劑量，使精子具有高度的運(yùn)動(dòng)性、活力和可育性。

當(dāng)前和之前的研究結(jié)果可以證明，在分子和細(xì)胞水平上，磁場的使用代表了一種成本效益高的診斷和治療方法，可以更好地選擇精子質(zhì)量，這種方法基于用于靶向低質(zhì)量精子凋亡細(xì)胞膜的蛋白包被珠，為了提高用于ICSI的精子比例，在目前的研究中，我們證明了更高的研究結(jié)果，因?yàn)樗麄兊腎CSI是從女性研究對(duì)象獲得的優(yōu)質(zhì)M2卵母細(xì)胞。

結(jié)論

與DGC相比，MASE作為一種實(shí)驗(yàn)室工具，在ICSI程序中是一種非常有效的精子選擇方案，在統(tǒng)計(jì)學(xué)上具有顯著意義，但建議未來的研究工作以多中心方式進(jìn)行，并考慮到患者的種族和種族差異，以更大的樣本量作為對(duì)結(jié)果的反應(yīng)。

遵守道德標(biāo)準(zhǔn)

資助：本研究由El Nada Fertility私人資助

中心利益沖突與作者身份確認(rèn)

我們特此確認(rèn)：

1、所有作者均參與了（a）數(shù)據(jù)的構(gòu)思和設(shè)計(jì)，或分析和解釋；（b） 針對(duì)重要的知識(shí)內(nèi)容起草或批判性修改文章；（c）最終版本的批準(zhǔn)。

2、本手稿未提交其他期刊或其他出版場所，也未在其他期刊或其他出版場所進(jìn)行審查。

3、作者與在手稿中討論的主題中有直接或間接經(jīng)濟(jì)利益的任何組織均無任何關(guān)聯(lián)。如果該技術(shù)是免費(fèi)提供的，并且每對(duì)受試夫婦都*同意，則涉及受試者，并可在其應(yīng)用上簽名。在涉及人類參與者的研究中執(zhí)行的所有程序均符合機(jī)構(gòu)和/或國家研究委員會(huì)的道德標(biāo)準(zhǔn)，并符合

1964年《赫爾辛基宣言》及其后續(xù)修正案或類似的道德標(biāo)準(zhǔn)。

“2019年2月至2019年8月，在El Nada生育中心對(duì)132對(duì)男性不育夫婦進(jìn)行了磁激活精子富集與密度梯度離心對(duì)ICSI結(jié)果影響的試驗(yàn)。獲得了所有個(gè)體的知情同意

參與研究的參與者。El Nada生育中心注冊(cè)號(hào)：阿拉伯埃及共和國衛(wèi)生和人口部2019年7月2日80"

El Nada倫理委員會(huì)主要聲明隨手稿附上。

El Nada生育中心，105 Horreya square，Maadi，開羅，埃及。